编者按：2018年7月6日，中国食用菌商务网专家团成员闫新发应邀前往湖南省新邵县云新高科农业科技开发有限公司，帮扶这个具有14年工厂化生产金针菇的企业发展秋栽和夏栽香菇产业扶贫工程，7~9月份帮助这个企业解决了链孢霉杂菌污泛滥问题。

 

    1、链孢霉发生情况

    工厂里的金针菇生产原料是以杉木为主的培养基配方，10多年以来都是用出过金针菇的废料作为灭菌燃料“循环”利用，从来没有发现链孢霉杂菌出现的踪影

    2017年初，该公司转向服务国家扶贫攻坚列，开始筹划承担新邵县扶贫目标任务，发展“富硒香菇”扶贫产业基地规划和菇棚建造施工阶段；2017年底，进入袋料香菇品种引进和实验阶段，2018年上半年进入实验出菇和扶贫产业实验推广阶段，下半年进入香菇菌种生产和香菇袋料生产阶段。

    2018年7月上旬，自然气温38℃左右，连续七八天的阴雨持续高温高湿天气。工厂里的“夏菇”实验技术员把香菇菌棒生产选出来的微孔袋料和破袋原料，割破塑料袋准备“晾干”继续使用，第三天（7月6日）早上发现拌料场上一片红色。工厂管理员随即采用石灰粉覆盖方法予以控制，覆盖之后的第二天清晨发现链孢霉的红色“粉包”透过石灰粉继续生长（参见图2）。链孢霉杂菌污染环境如此猖獗让人惊恐！惊叹！

图1:链孢霉杂菌在培养料上快速蔓延生长现象

图2:链孢霉透过石灰粉疯狂生长：

    2、链孢霉对秋栽香菇袋料的危害现象

    工厂里的香菇袋料生产期间，灭菌袋料微孔、塑料袋扎口的塑料袋部位、栽培袋底部的塑料袋热压折叠的缝隙内和裂口的袋料，只要是有袋料灭菌过后降温过程引起内部呼吸，或者栽培袋破损部位，或者存储培养料表面潮湿和营养条件的情况下，接连不断地发生链孢霉杂菌污染现象（如图3所示）。

    图3:链孢霉在灭菌袋料微孔和塑料袋表面的生长状态 

    为了控制链孢霉杂菌污染因素，企业对香菇袋料生产工艺和接种工序进行了规范化调整 

 

   3、链孢霉的防控措施：

    3.1 链孢霉菌的生长与传播条件分析：据文献资料记载，链孢霉(Neurospora)亦叫脉孢霉、粗糙脉孢霉(N.crassa)、红面包霉，俗称红霉菌，红娥子，常见的有粗糙脉孢菌和间型脉孢菌。在分类学上属子囊菌亚门，粪壳霉目，粪壳霉科。无性世代为半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丝孢种的链孢霉属，生活史需要具备的条件如下：

    （1）、温度：链孢霉菌丝在4-44℃均能生长，25-36℃生长最快，4℃以下停止生长，4-24℃生长缓慢。在31-40℃条件下，只需8小时菌丝就能长满整个试管斜面。孢子在15-30℃萌发率最高，低于10℃萌发率低。由于链孢霉在30℃以上生长迅速，是在6-9月高温季节生产期间危害最严重的一种病害。

    （2）、湿度：在适宜食用菌生长的培养料含水量53%-67%范围内，链孢霉生长迅速，含水量低于40%以下或高于80%以上，则生长受阻。

    （3）、酸碱度：链孢霉对酸碱度适应范围比较宽，培养基pH在3-9范围内都能生长，最适为PH5-7.5。在琼脂、谷粒、麸皮培养基上链孢霉属都能迅速生长，但培养基pH较低的适于链孢霉属的生长，PH较高的适于脉孢霉属的生长。

    （4）、空气：链孢霉属好气性微生物，在氧气充足时，分生孢子形成快，无氧或缺氧时，菌丝不能生长，孢子不能形成。

    （5）、营养：培养料糖分和淀粉含量偏高是链孢霉菌发生和蔓延的重要营养元素。

    链孢霉广泛分布于自然界土壤、树木、野草、禾本料植物以及潮湿的物体表面，尤其在玉米芯、棉籽壳、麸皮等淀粉含量较高的原料上面极易发生。

    链孢霉菌丝体初期为绒毛状白色或灰色，后期匍匐生长，分枝，分生孢子梗直接从菌丝上长出，与菌丝无明显差异，梗顶端形成分生孢子。分生孢子卵形或近球形，成串悬挂在气生菌丝上，形成橘红色粉包，粉包轻触或经风吹即可弹射孢子。其分生孢子在空气中到处漂浮，主要以分生孢子传播危害，是高温高湿季节发生最重要的杂菌。

    链孢霉的孢子萌发、菌丝生长速度极快。特别是气生菌丝(也叫产孢菌丝)顽强有力，它能穿出菌种的封口材料，挤破菌种塑料袋，形成数量极大的分生孢子团，有当日萌发、隔日产孢高速繁殖之特性。在20-30℃的温度范围内，在斜面培养基上，一昼夜可长满整个试管，在木屑、玉米芯、棉籽壳、麸皮培养料上，蔓延迅速，传播力极强。

    发菌室内假如发现一部分菌袋感染上链孢霉，菌袋受其污染后，即在料面迅速形成橙红色或粉红色的霉层——分生孢子堆。霉层如在塑料袋内，可通过某些孔隙迅速布满袋外，在潮湿的棉塞上，霉层厚度可达1厘米。3天后整个生产场地都会布满了链孢霉粉红色孢子，菌袋一经污染很难彻底清除，经常引起整批菌种或菌袋报废，甚至造成毁灭性损失。如果出现链孢霉污染的菌包被老鼠咬过，老鼠走到的地方都会传播链孢霉，或者是链孢霉粉包被大风吹过，就会出现势不可挡的扩散现象。该菌来势之猛、蔓延之快、为害之大，一旦大量发生，失去控制，便是灭顶之灾。

    3.2预防感染链孢霉的处理措施

    3.2.1 生产环境消毒处理：发现微孔袋料无一幸免链孢霉污染的袋料，说明自然空气中的链孢霉孢子漂浮的密度相当严重，它们是在袋料冷却和运输过程，借助空气流通或者温差流动过程，接触到空气中的漂浮孢子而发展的，因为高温高湿度环境空气湿度在60%以上，经常处于潮湿或湿润状态，漂浮的孢子粉末附着在植物、杂草、物体表面不会死亡，环境中的物体、植物、地面、设备表面的孢子粉随时都会被风吹到空中到处飞舞，遇到机会就附着在表面发展。

    控制环境控制传播的方法是，采用高压喷雾机（果树喷雾器），配用0.3%克霉灵或者84消毒液溶液，对生产场地和外界环境进行严密雾化降尘处理，每天早晚各一次，连续处理3~6天，以后每6~10天处理一次，如果发现污染现象，继续采取连续3~6天的环境空气消毒方法再次处理。

    3.2.2 生产工艺处理：根据发现香菇袋料出现问题的部位分析，因为袋料微孔冷却过程吸入自然空气、袋子头部和尾部的棱角部位，具备阻碍自然空气流通的褶皱部位提供给孢子停留机会而产生；这些部位在接种过程消毒药品都是不能达到的部位，所以它们的发生部位大多数都是在袋子的两头具有隐藏缝隙的位置。

    面对此类情况，除了环境消毒、空气消毒防控措施之外，必须从生产工艺程序的每个环节进行“封闭性”控制，不给链孢霉杂菌孢子提供滋生和繁殖的机会。例如，灭菌之后的袋料要趁热80℃转运、趁热码堆后覆盖塑料蓬膜、四周压严不漏气、按照说明书用药量“每立方米4~8克”最大用量配置气雾消毒药品用量，分散多点位点燃气雾消毒剂、在封闭消毒条件下降温、减少或者缩短袋料移动距离长度、采用塑料箱和塑料吊帐接种、创造人为控制的“封闭环境”、对接种发菌袋料每天巡查发现问题立即处理、对发现问题的环境空间和表面消毒处理。并对厂区和发现链孢霉的菇棚周边、生产场地、周边环境、自然空气和物体表面，采用0.3克霉灵或84消毒溶液3~6天一次的“定期消毒”。

    3.2.3 及时处理污染杂菌袋料：对发现问题的袋料，轻拿轻放，放到经过克霉灵或者84消毒液浸湿处理的袋子里面，扎口运送到灭菌消毒处理位置予以安全消毒处理。例如大批量处理的蒸汽灭菌柜里采取蒸汽杀死、或者锅炉房直接焚烧、或者土坑深埋、或者堆放之后用废料覆盖发酵发热处理，对于灭菌之后的不合格袋料，随即返回到配料车间继续装袋，或者码放到灭菌柜里再次灭菌处理。

       对于已经发展到塑料袋外面的粉红色粉包处理要特别小心，如果触及粉包，就会到处飞扬，扩展污染范围。发现链孢霉的粉包，要用柴油缓慢滴入粉包周边，由粉包缓慢吸收、变色之后予以封闭，或者用消毒药品浸湿的卫生纸、餐巾纸覆盖粉包，限制孢子飞扬的情况下，再做移动或装袋封闭处理。对于面积较大的链孢霉污染粉包较多环境，必须采用柴油空中远距离喷雾方式予以控制，保障防止链孢霉粉包不能弹射孢子的情况下，再用PH12~14的石灰水溶液浇灌发展链孢霉污染的原料，再进行铲除清理。

    3.2.4 总结消毒处理经验及其效果：①石灰粉表面覆盖或地面消毒方法，因缺少水分而失去碱性抑制杀菌效果，或者石灰膏覆盖链孢霉粉包的表面处理，只能是对地面表面的覆盖消毒和覆盖部位的湿润化学反应的碱性局部消毒，对空间和物体表面起不到良好效果。②空间和物体表面消毒方法，适宜采用300倍克霉灵或者20倍新洁尔灭或或84消毒液或来苏尔药品溶液，用喷雾器对高空中的空气雾化降尘、对物体表面喷雾直接消毒，喷雾效果要求达到地表或者物体表面湿润状态为适宜。③链孢霉的粉包处理：浇上柴油立即变成樱桃红色，在开口部位浇上200倍84消毒液，粉包部位马上下陷成突凹状态，对于微孔上面冒出来的粉包处理方法是先用柴油喷雾或喷浇固定之后再移动，可以有效控制粉包震动弹射或者被风吹飞扬。④杀灭菌丝的实验：没有掩埋或者焚烧条件的情况下，再用打火机烧开塑料袋，用柴油或者高浓度84消毒液灌入烧开塑料的培养料中，杀死菌丝体，再做柴草覆盖的焚烧处理。⑤发现链孢霉的处理过程要把防止孢子飞扬，抑制粉包扩散作为操作控制关键，处理效果必须安全可靠，对于产生菌丝体的袋料采取焚烧、蒸汽杀菌是比较安全有效措施。

    3.2.5 确定安全防控制度化：确定每天巡查制度，对所有发菌的袋料，码垛时都要留开空隙，方便每天巡查，定期对培养环境采取适宜的环境空气消毒措施，只要是发现问题的地方，都要立即采取现场消毒措施，并对附近环境空气和地面予以消毒处理。

 

 

    附件：无菌化生产管理经验，适用于杂志空隙填充

    规模化接种及其环境消毒方法

    1、关于基地大棚的接种箱接种方法问题：

    ●袋料降温：灭菌之后的袋料，要趁热装车，趁热摆放到“铺上塑料”的地面上，覆盖塑料蓬膜“气雾消毒降温”。

    ●摆放方式：袋料码垛地面必须铺上塑料蓬膜或者地膜，以码垛方式摆放，码垛长度11~13米（25或32米长度的菇棚分为两段），码垛高度10~12层，每排袋料码垛间隙为一个袋料长度距离。每个码垛面积大约4000~5000袋之间，不宜超过数量。

    ●每个拱棚的摆放数量以不超过10000袋为适宜。

    ●接种箱接支架的摆放，以适宜装入袋料距离为宜，需要注意接种箱支架的四个腿保持平稳，不要划伤塑料单。

    ●接种之后的袋料，采用川子型摆放8层养菌，每个川子垛之间要留出10-20公分的间隙，有利于巡查霉菌情况，川子垛摆放长排以四排为一组，两组之间留出50公分的检查通道。

    2、关于克霉灵溶液消毒范围：

    ●可以用0.3%溶液用于菌棒菌种表面浸水消毒、●接种空间喷雾消毒、●环境空气喷雾消毒、●杂菌污染处理的袋子浸水处理。

    ●灭菌之后的“出锅”环境雾化消毒、●养菌房间和菇棚定期喷雾消毒、●出现杂菌污染环境空气喷雾消毒，

    ●接种工具和用品表面消毒、●袋料表面消毒接种等等。

    克霉灵 百度百科

   克霉灵也叫甲帕霉素，由山西奇星有限公司生产，可由于医疗领域，如治疗细菌性阴道炎；还广泛用于食用菌生产，杀死病原微生物。

   别名美帕曲星 , 克霉灵 甲帕霉素、甲帕霉素十二烷基硫酸钠、甲帕霉素十二烷硫酸纳克霉灵、甲帕曲星、美帕曲星十二烷基硫酸、美帕曲星十二烷基硫酸钠、孟曲星药理作用为抗深部真菌药，对白色念珠菌有较强的抑制作用，其作用类似两性霉素B，与霉菌细胞膜的甾醇结构结合而破坏膜的通透性。十二烷基硫酸钠促进美帕曲星透过肠膜吸收进入血流，被吸收的药物在肾脏内有较高的浓度，并由尿液排泄，对阴道真菌感染有效。未吸收的药物则由粪便排出体外。还对滴虫有抑制作用。本品为多烯类抗真菌抗生素。同时具有抗寄生虫作用。

    3、开放式接种的服装要求: 统一选择，可以紧口衣服、头戴护发帽子、棉质口罩、裤腿和鞋袜的塑料套，配套服装，

    主要防护目标和方法是：

    ●不允许头发随意活动，固定包装头发，不允许头发随意活动释放不良气体或空气；

    ●不允许呼出气体未经过滤释放到接种空间；

    ●不允许衣服领口、袖口、上衣下摆没有紧口配置，而将内衣的空气随意释放到接种空间，上衣下摆最佳方案是装到裤腰里面扎紧裤腰带，

    ●不允许裤腿和鞋袜随意释放裤子内部和鞋袜里的携带杂菌的气体；

    ●不允许随意进入接种室的门口，必须在门口内部设置塑料隔离缓冲条件，所有进入接种环境的人，都要进行全身消毒和自身携带空气的消毒过程之后，再进入接种环境内；

    ●不允许接种室（棚）门口的自然开关状态，门口必须严密封闭，不允许外界空气随意进入接种环境；

    ●不允许接种期间随便说话，更不允许随便出入接种室（棚）的门口，必须一次进入接种结束再出门口；

    ●不允许消毒一次连续两次接种，必须一次消毒，一次接种结束，如果必须停止接种的情况下，必须按照消毒程序消毒以后再继续接种。